細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒

產(chǎn)品描述： Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 作為 MTT 法的替代方法，可對細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性進(jìn)行快速、高靈 敏度、無放射性的比色檢測，廣泛應(yīng)用于抗腫瘤藥物篩選、生物活性因子檢測、細(xì)胞增殖或毒性測定、 腫瘤藥敏等試驗(yàn)。 CCK-8 試劑無需預(yù)配即可直接加入細(xì)胞樣品中，試劑中含有 WST-8 [2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)- 3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium,monosodium salt]，WST-8 在電子耦合試劑（1- Methoxy PMS）的作用下被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色 Formazan，產(chǎn)物數(shù)量與活 細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系，通過測定 450 nm 處吸光值的變化即可反映活細(xì)胞的數(shù)量。

細(xì)胞增殖與毒性檢測試劑盒

注意事項(xiàng)： ①CCK-8的培養(yǎng)時(shí)間一般為1-4小時(shí)，需要摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間， CCK-8的最佳反應(yīng)時(shí)間以具體顯色最佳時(shí)間為準(zhǔn)； ②孵育時(shí)間因細(xì)胞類型和數(shù)量而異；白細(xì)胞著色較弱，可能需要較長的孵育時(shí)間或大量細(xì)胞； ③當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時(shí)，貼壁細(xì)胞的最小接種量為1000個(gè)細(xì)胞/孔（100 μL培養(yǎng)基）；檢測白細(xì)胞 時(shí)的靈敏度相對較低，推薦接種量應(yīng)不低于2500個(gè)細(xì)胞/孔（100 μL培養(yǎng)基）；如果要使用24孔板或6 孔板，請先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液； ④如果沒有450 nm濾光片，可以使用430-490 nm之間的濾光片，但450 nm檢測靈敏度最高。如果 您需要進(jìn)行雙波長測定，650 nm處的吸光度可作為參考波長進(jìn)行測定； ⑤培養(yǎng)基中的酚紅不會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，酚紅的吸光度可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去； ⑥本產(chǎn)品可以檢測E.coli，但不能檢測酵母細(xì)胞； ⑦如果您需要對CCK-8溶液進(jìn)行無菌處理，請使用0.2 μm濾膜過濾除菌； ⑧使用96孔板進(jìn)行檢測時(shí)，96孔板外圈孔位易蒸發(fā)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長，可以選擇棄用外圈 孔位，或改加等量的PBS、水或培養(yǎng)液作為填充液。